Добре дошли в мъжкия кът

Нашата цел е всички мъже да имат знанията преди нуждата.
Ние разбираме, че за вашето репродуктивно здраве може да е трудно да се говори – особено за мъжете. Ето защо създадохме тази „само за мъже“ секция на нашия уебсайт, за да ви помогнем да разберете своята фертилност и възможностите за лечение

Зачеването на здраво бебе зависи от редица фактори, включително здрави сперматозоиди. Всъщност мъжкото безплодие е вторият най-голям проблем след възрастта на жената, така че е важно да разберете как работи мъжката репродуктивна система.

Мъжкото безплодие засяга около половината от всички безплодни двойки.Добрата новина е, че най-често срещаните причини за мъжкото безплодие се диагностицират лесно и на повечето от тях може да се помогне.

Анализ на спермата

Обработка на сперматозоиди с анализ на биологичната жизнеспособност

Микробиологичен анализ на еякулата

Тест за функционална зрялост на сперматозоидите (HBA тест - Sperm-Hyaluronan Binding Assay)

Тест за наличие или отсъствие на левкоцити в еякулата (MAR тест)

Подробен морфологичен анализ на сперматозоидите (по строгите критерии на Крюгер)

Тест за жизненост на сперматозоидите

Тест за безплодие при мъжете с оксидативен стрес (с помощта на MiOXSYS)

Оценка на фрагментацията на ДНК в човешки сперматозоиди

Обработка на сперматозоиди

Центрофугиране на сперма

Центрофугирането е един от основните методи, използвани за обработка на спермата и изолиране на сперматозоиди. Тази процедура се извършва при стерилни лабораторни условия и е показана за последващи техники за асистирана репродукция, като вътрематочна инсеминация (IUI), конвенционално ин витро оплождане (IVF) и/или ICSI (интрацитоплазмено инжектиране на сперматозоиди). Центрофугирането се използва и в случаи на ретроградна еякулация, замразяване на сперматозоиди (криоконсервация) и азооспермия (липса на сперматозоиди). В случаите на азооспермия целта на центрофугирането е сперматозоидите да се концентрират на дъното на епруветката под формата на седимент, като същевременно се намали обемът на еякулата. Ако има сперматозоиди, те ще бъдат изолирани и могат да се използват за оплождане чрез ICSI.

Техника на плуване нагоре

Техниката „плуване нагоре“ е метод, използван за подбор на сперматозоиди въз основа на тяхната подвижност в спермата и средата за култивиране. Важно е спермата да не се центрофугира преди прилагането на метода „swim-up“, тъй като това може да влоши подвижността на сперматозоидите и да увреди клетъчните им мембрани. Този метод е идеален за отделяне на подвижните сперматозоиди от неподвижните. Процедурата включва наслояване на втечнената сперма под хранителна среда или поставяне на спермата над средата. Подвижните сперматозоиди плуват в хранителната среда, докато неподвижните остават зад нея. При този метод се получават по-малко сперматозоиди в сравнение с други техники за изолиране, но се подбират сперматозоиди с по-добро качество, което е важно за оплождането при IVF или ICSI.

Центрофугиране в градиент на плътност

Центрофугирането в градиент на плътност е техника, която отделя и концентрира подвижните сперматозоиди, като същевременно елиминира неподвижните сперматозоиди, клетъчните остатъци, зародишните клетки и клетките на имунната система (като левкоцити, лимфоцити и червени кръвни клетки). При този метод се използват градиентни разтвори с различна концентрация (напр. 40 % и 80 %), за да се отделят сперматозоидите въз основа на тяхната плътност. Най-подвижните сперматозоиди се утаяват като седимент на дъното на епруветката, докато неподвижните сперматозоиди и други клетки остават на границата между различните концентрации на градиентния разтвор. Тази техника обикновено се използва за подготовка на сперматозоиди за конвенционално IVF или ICSI.

Изплуване след центрофугиране в градиент на плътност

Тази техника съчетава два метода за изолиране на сперматозоиди – центрофугиране в градиент на плътност, последвано от метода „swim-up“. Еякулатът първо се обработва чрез центрофугиране в градиент на плътността. След това утайката се покрива с подходяща хранителна среда и подвижните сперматозоиди изплуват в средата. Този подход обикновено се използва за подготовка на сперматозоиди за оплождане чрез ICSI или IVF.

Магнитно-активирано сортиране на клетки (MACS)

MACS е метод, използван за селективно отстраняване на сперматозоиди с фрагментирана ДНК и такива, които са подложени на апоптоза (програмирана клетъчна смърт), като същевременно се запазват сперматозоиди с непокътнати плазмени мембрани. Процедурата използва магнитни микросфери, покрити с анексин V, който се свързва с фосфатидилсерин (липид), който се появява на повърхността на апоптотичните сперматозоиди. След това сперматозоидите преминават през разделителна колона в магнитно поле, където дефектните сперматозоиди се задържат, а здравите преминават. Получената проба от сперматозоиди, съдържаща само жизнеспособни сперматозоиди с непокътната ДНК, се използва за ICSI или други процедури за асистирана репродукция. MACS се препоръчва в случаи на тежко мъжко безплодие, повишен индекс на фрагментация на ДНК (DFI >30%), неуспешни предишни опити за оплождане, ембриони с лошо качество, повтарящи се неуспешни имплантации или спонтанен аборт.

Микрофлуидни системи (микрочипове) за изолиране на сперматозоиди

При асистираната репродукция най-ефективният начин за преодоляване на тежкото безплодие, причинено от мъжкия фактор, е чрез ICSI, което включва инжектиране на предварително подбрани сперматозоиди в зряла яйцеклетка. Подборът на сперматозоиди е от решаващо значение за успешното забременяване по време на цикъла на IVF. Естествените механизми, които насочват сперматозоидите към яйцеклетката, предоставят идеален модел за разработване на техники за преодоляване на репродуктивните предизвикателства. Сперматозоидите преминават през естествени микроканали в женския репродуктивен тракт, за да достигнат яйцеклетката. Това движение може да бъде имитирано in vitro с помощта на микрофлуидни системи, които пресъздават пътя на сперматозоидите и улесняват изолирането им за оплождане. Последните разработки на микрофлуидни системи увеличиха приложението им в техниките за асистирана репродукция, включително изолиране на сперматозоиди, оплождане и култивиране на ембриони. Тези системи печелят признание поради по-високата си ефективност в сравнение с конвенционалните техники като центрофугиране, плуване и центрофугиране в градиент на плътност. Микрофлуидните устройства могат да селектират подвижни, висококачествени сперматозоиди с ниска ДНК фрагментация само за 10-30 минути, създавайки по-естествена и ефективна среда за селекция на сперматозоиди. Микрочиповете работят, като използват малки канали, които симулират женския репродуктивен тракт, осигурявайки ограничена среда, която позволява сперматозоидите да бъдат отделени въз основа на подвижността и морфологията. Използването на микрофлуиди елиминира необходимостта от предварителна обработка на спермата, стига пробата да не е твърде концентрирана или вискозна, а сперматозоидите могат да се наблюдават по време на процеса на селекция под микроскоп.

Обработка и изолиране на сперматозоиди от ретроградна еякулация

В случаите на ретроградна еякулация сперматозоидите се изолират от урината, за да се използват при техниките за асистирана репродукция или за замразяване. Ретроградна еякулация се получава, когато спермата, вместо да бъде изхвърлена през уретрата, се пренасочва към пикочния мехур поради неправилно функциониращ сфинктер. Това състояние може да доведе до намален обем на еякулата или дори до пълна липса на сперма (аспермия). В такива случаи сперматозоидите се събират от урината, която ще изглежда мътна след оргазъм. Ако ретроградната еякулация не може да се лекува фармакологично, сперматозоидите се изолират чрез алкализиране на урината, за да се повиши рН и да се запази подвижността на сперматозоидите.

Аспирация/биопсия на тестисите и епидидима (PESA, MESA, TESA, TESE)

Техниките за аспирация/биопсия на тестисите (TESA, TESE) и епидидима (PESA, MESA) се използват за извличане на сперматозоиди директно от тестисите или епидидима. Тези техники са показани при мъже с азооспермия - състояние, при което сперматозоидите липсват в еякулата. Сперматозоидите, извлечени от тестисите или епидидима, не са напълно зрели и може да нямат подвижност и способност да оплодят яйцеклетка, въпреки че са генетично нормални. Тези сперматозоиди се нуждаят от техники за асистирана репродукция, като ICSI, за да се улесни оплождането и забременяването. Всички жизнеспособни сперматозоиди, останали след ICSI, могат да бъдат замразени за бъдеща употреба. Съществуват няколко метода за извличане на сперматозоиди:
PESA (перкутанна епидидимална аспирация на сперматозоиди) включва поставяне на игла през кожата на скротума, за да се съберат сперматозоиди от епидидима.
MESA (микроепидидимална аспирация на сперматозоиди) е подобна техника, но включва хирургичен достъп до епидидима.
TESA (Тестикуларна аспирация на сперматозоиди) включва използване на игла за извличане на сперматозоиди директно от тестисите.
TESE (Тестикуларна екстракция на сперматозоиди) включва хирургично отстраняване на малка тъканна проба от тестисите за получаване на сперматозоиди.
Тези техники се препоръчват при мъже с азооспермия, причинена от първична тестикуларна недостатъчност, вродена липса на семепроводи, обструктивна азооспермия или след вазектомия. Възможността за извличане на сперматозоиди от тестисите или епидидима позволява оплождане чрез ICSI, без да е необходима донорска сперма, дори когато броят на сперматозоидите е нисък или липсват в еякулата.

Замразяване на сперматозоиди

Замразяването на сперматозоиди е процедура, предназначена за запазване на сперматозоидите при оптимални условия, което гарантира успешното им използване дори след продължителен период от време. Гаметите се криоконсервират чрез метод за бавно охлаждане с контролирана скорост или, напоследък, чрез техника за бързо замразяване, известна като витрификация. Сперматозоидите се съхраняват с помощта на криопротектор, обикновено 10% глицерол в хранителна среда. За да се повиши жизнеспособността, да се намали смъртността и да се запази висок процент подвижни сперматозоиди след размразяването, могат да се включат допълнителни криопротектори, като растежни фактори и холестерол.

Криоконсервираната сперма се използва за донорство на сперма или за запазване на плодовитостта при мъже, подложени на вазектомия или на лечение, което може да застраши плодовитостта, като химиотерапия, лъчетерапия или операция. Замразяването на сперматозоиди се извършва по различни причини, включително:

Преди лъчетерапия или химиотерапия, които могат сериозно да нарушат сперматогенезата и потенциално да доведат до нейното пълно спиране.
Преди хирургични процедури върху мъжката репродуктивна система.
При подготовка за процедура по IVF, когато партньорът от мъжки пол не може да присъства в деня на извличане на яйцеклетки.
Когато събирането на сперматозоиди е трудно поради стрес, тревожност или здравословни проблеми, които възпрепятстват нормалната еякулация.
В случаи на значителни аномалии, установени при анализа на спермата.
Когато пациентът желае да запази спермата си по лични причини.